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熒光顯微鏡是光學(xué)顯微鏡的一種，是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。以紫外線(xiàn)為光源，用以照射被檢物體，使之發(fā)出熒光，然后觀(guān)察物體的形狀及其所在位置。用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。

 

熒光顯微鏡是以紫外光或藍(lán)紫單色光激發(fā)標(biāo)本來(lái)產(chǎn)生熒光，因?yàn)樽贤夤獠豢梢?jiàn)，故由標(biāo)本發(fā)出的熒光與背景反差很大，即熒光顯微鏡通常在黑暗的背景下觀(guān)察彩色的圖像;而普通顯微鏡是在明亮的背景下觀(guān)察較暗的樣品。這樣熒光顯微鏡的對(duì)比度比普通顯微鏡提高約100倍，因此可觀(guān)察到普通顯微鏡下看不到的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)。熒光顯微鏡具有對(duì)比度高這個(gè)突出的優(yōu)點(diǎn)，得到了廣泛的應(yīng)用。

 

熒光顯微鏡有兩種不同類(lèi)型：

 

1.透射式熒光顯微鏡

 

它和普通光學(xué)顯微鏡類(lèi)似，光源是從鏡座出發(fā)經(jīng)過(guò)聚光鏡到達(dá)樣品激發(fā)熒光后通過(guò)物鏡，最后到達(dá)目鏡。

 

2.落射式顯微鏡

 

大部分的熒光顯微鏡也是采用這種類(lèi)型。它的光源是通過(guò)物鏡落到樣品上，激發(fā)熒光以后再發(fā)射回物鏡，最后到達(dá)目鏡。

 

不論是透射式的熒光顯微鏡還是落射式的，它們的光源都要經(jīng)過(guò)激發(fā)濾色鏡過(guò)，濾掉一部分的可見(jiàn)光。激發(fā)樣品發(fā)出熒光后，還要經(jīng)過(guò)阻斷濾色鏡，過(guò)濾掉一部分多余的激發(fā)光。最終，這使得我們觀(guān)察到的是熒光物質(zhì)染色部分所發(fā)出的熒光。